炎德英才大联考2024届高三月考试卷四生物试卷答案

炎德英才大联考2024届高三月考试卷四生物试卷答案

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24.(15分,除标注外,每空2分)(1)引物是根据 phyL基因的一段已知序列设计合成的(1分)PxtI和XhoI(2)加热至90~95℃(1分)Taq酶热稳定性高而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下失活引物1和2之间不能互补配对(3)标记基因筛选、检测目的基因是否导入受体细胞(4)在pH为7左右一定范围内,设置一系列pH梯度的植酸溶液,分别加入等量的phyC1,一段时间后测定植酸的剩余量(或无机磷的产生量)(3分,合理即可)【解析】(1)利用PCR技术扩增phyC1基因,需要以phyC1基因为模板合成的引物,这样引物能够在基因组中与phyC1基因的cDNA特异性结合,从而利用PCR扩增技术转移性扩增出phyC1的cDNA。设计引物时,应在引物1和引物2的5端加上不同限制酶的识别序列。由图可知,只有PstI和XhoI的识别位点在启动子和终止子之间,故应在引物上添加上PstI和XhoI的识别序列(2)PCR扩增时,当反应体系的温度加热至90~95℃时,cDNA解链为单链;在DNA延伸的过程中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是Taq酶热稳定性高而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下失活。为确保引物能与模板结合,保证PCR正常进行,两个引物之间不能互补配对。(3)构建的基因表达载体pPIC9K-phyC1中,除含有图中所示启动子、终止子和phyC1基因外,还应含有标记基因,标记基因的作用是筛选、检测目的基因是否导入受体细胞。(4)设计实验探究phyC1的最适pH,可在pH为7左右合理的一定范围内,设置一系列pH梯度的植酸溶液,分别加入等量的phyC1,一段时间后测定植酸的剩余量(或无机磷的产生量)。植酸剩余量最少的组对应的pH即为最适pH。

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